实验平台
细胞生物和分子病因学平台
购置了细胞拉力加载系统、流式分选仪和定量PCR仪、高内涵筛选系统、蛋白芯片检测系统、全自动生化分析仪和图像处理系统,可以更好地进行心血管重塑相关疾病的细胞生物和分子生物学研究。
(1)高内涵系统
高内涵筛选和分析系统集流式细胞仪和荧光显微镜的功能于一体,是在不破坏细胞整体结构的条件下,对细胞进行多通道,多靶点的荧光扫描检测,由冷CCD成像技术捕获图像信息后,经高智能分析系统进行多指标在线分析,最终获取药物或各类刺激对细胞内及细胞间信息的综合性生物学评价平台。高内涵技术可在单一实验中获取包括细胞形态、生长、分化、迁移、凋亡、代谢途径及信号转导等多个环节的相关信息,检测样品的生物活性和潜在毒性,获得样品对细胞产生的多维立体和实时快速的生物效应信息。
我们利用高内涵筛选分析体统进行了细胞周期、信号分子蛋白转位等分析。
(2)细胞拉力加载系统
引进了flexcell FX-5000T系统,为二维细胞和三维细胞提供双轴向应力和单轴向应力,是当今科研界最先进的细胞应力加载系统。以动脉-静脉旁路移植手术后移植静脉再狭窄的机制研究为例,移植静脉受到动脉血流的冲击,血管机械牵张力增加,造成平滑肌的增殖、迁移,从而导致移植静脉的再狭窄。我们通过此细胞拉力加载系统可以在体外对二维或三维培养的平滑肌细胞给予机械牵张力,研究其增殖迁移的机制。
(3)流式细胞仪
流式细胞仪是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量,并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。
目前本实验室应用流式细胞仪开展的实验项目有:血液或组织炎症细胞的数量及分型分析、检测细胞凋亡、分析细胞周期、CBA分析血液、组织或细胞上清炎症因子水平、细胞分选。
(4)数控剪切流活细胞自动分析系统
BioFlux 200数控剪切流活细胞自动分析系统提供了完成生理相关的剪切流研究的基本配置,系统可以结合已有的倒置显微镜。在模拟活细胞在身体内受到血流减切力的生理状态下,进行长时间活细胞观察。能够提供接近生理环境的可控、恒定剪切力,提高生理相关性。能够满足高通量要求,最多可同时完成96个平行试验。可为厌氧微生物提供低氧或无氧的培养条件。
(5)全自动膜片钳系统
Port-a-Patch全自动膜片钳是新一代细胞膜离子通道信息测量系统。该系统由于采用了自动化技术手段,将传统的操作过程大大简化,免除了人工操作的繁琐,节省了大量时间,实验成功率可得到大幅度提高。主要用于测量动物、植物细胞或蛋白上离子通道的电流变化。研究细胞上离子通道变化规律,适用于各种细胞系和多种原代细胞,如用于研究动物细胞(HEK293、CHO、神经细胞等)在各种抑制剂或阻断剂处理下的影响,以及细胞内部的调整变化和机制研究。
(6)微重力旋转细胞培养系统
三维微重力细胞/组织培养系统能提供理想的体外生长环境,通过由可高压灭菌反应容器内的氧交换膜进行氧交换,使细胞可以聚生、成三维生长和分化,可进行极脆弱的细胞培养以及动物细胞的共同培养,可生成理想的三维组织,并具有亲本组织的结构和功能,可培养悬浮细胞和贴壁细胞。为研究体外三维状态下的细胞和组织的生长分化提供了平台基础。使用该系统进行骨髓细胞体外诱导分化后进行移植的工作。
(7)生物分子相互作用系统
SensiQ是一系列以表面等离子共振(SPR)技术为基础的高性价比双通道生物传感系统。应用该系统,研究人员能够更为透彻地明了生物分子间相互作用的动力学和亲和性。这些相互作用的特性,对于药物研发、细胞信号传导、基因调控、抗体筛选等研究取得成果至关重要。SensiQ高效整合了一流的光学传导装置、精细的微射流系统、实时的参照减除功能、先进的表面化学技术,以及直观的数据分析软件,完美地展示出一系列性能价格比极高的生物传感系统,使得这种尖端的和实时的生物分子间相互作用分析应用在众多领域。计划使用该系统进行转录调节方面的研究。